美國 ISS 熒光粒子計數器Quanta
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Quanta專門用于測量單個的熒光粒子。這些粒子是本身可發出熒光的或是用某個合適的熒光團對其標記。不管是哪一種情況,使用的激光波長須與熒光團的激發波長吻合。
Quanta是如何運行的
Quanta系統是專為測量單個熒光粒子而設計的;這些粒子要么是具有本征熒光特性的,要么須用某個合適的熒光團對其標記。不管是哪一種情況,使用的激光波長必須與熒光團的激發波長吻合。
該儀器 (參見布局圖) 使用了低功率 (數毫瓦) 的激光作為激發源;激光光束穿過二向色鏡并通過一個低放大倍數且長焦距的物鏡 (通常來說是5-8mm) 聚焦至樣品上。熒光由該物鏡收集,并經二向色鏡轉向傳輸至光探測器 (光電倍增管)。
激光模塊有多個波長可選擇,覆蓋了375nm至635nm的范圍;它們與二向色濾光片結合使用,具體如何正確地組合取決于測量所用熒光團的吸收和發射特性。
在被檢驗的液體中,激發激光光束與聚焦物鏡共同界定了一個圓錐形體積。激發體積的幾何尺寸是一個有關物鏡放大倍數和焦距的函數。

溶液容器是一個玻璃瓶,通過一個緊密貼合的底座和一個連接到樣品臺頂部的彈簧施壓中心瓶蓋并被固定在樣品臺內。這項技術的一個關鍵點是樣品支架的移動。瓶子被放置在一個旋轉支架中;通過離心力,熒光粒子聚集在靠近瓶壁處,便于探測。此外,瓶子的支架可以進行垂直移動。旋轉和垂直的位移使得激光光束能夠在瓶子的整個體積中探測,以尋找熒光粒子。
每當一個粒子進入激發體積時,它會吸收激發光;熒光會在特征衰減時的時間范圍內發射并發出一道信號光。接著會對峰值的數量進行計數,每一個峰值都對應了一個穿過激發體積內的粒子。
模式識別 (PR) 軟件會分辨粒子的計數與背景噪音,并重現觀測體積中出現的粒子總數。
Quanta的應用
- 蛋白質聚集;
- 納米顆粒濃度的測定;
- 計量生理液體中病毒、噬菌體及其聚集體的數量;
- 辨認極小數量粒子的存在。
主要參數
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光源 |
375, 405, 440, 473, 488, 514, 532, 635 nm波長的半導體激光器 |
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探測器 |
高性能PMT |
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樣品支架 |
玻璃瓶 (直徑10 mm,高度40 mm) 溶液體積:約3 ml |
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電腦 |
可便攜的,Windows 10, 64比特 |
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軟件 |
ISS的Quanta |
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大小 |
40 (深) x 53 (寬) x 19 (高) cm |
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重量 |
20(kg) |
更多技術細節可參看
“Rapid detection of single bacteria in unprocessed blood using Integrated Comprehensive Droplet Digital Detection.” Kang, D.-K., Ali, M.M., Zhang, K., Huang, S.S., Peterson, E., Digman, M.A., Gratton, E. & Zhao, W. Nature Communications, 5(1), 2014, Nov. doi: 10.1038/ncomms6427.
“Dual channel detection of ultra low concentration of bacteria in real time by scanning fluorescence correlation spectroscopy.” Altamore, I., Lanzano, L. & Gratton, E. Measurement Science and Technology, 24(6), p. 065702, 2013, May. doi: 10.1088/0957-0233/24/6/06570
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